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Alexa Fluor®



受容体を介したエンドサイトーシスおよびファゴサイトーシス用のAlexa Fluor® コンジュゲート

Alexa Fluor® ランスフェリンコンジュゲート
トランスフェリンは単量体の血清中にある糖タンパク質で2個の鉄原子(Fe3+)と結合し、受容体を介したエンドサイトーシスにより脊椎動物の細胞に鉄を輸送します。 最近の研究では蛍光標識したトランスフェリンを用いて哺乳動物および寄生虫におけるトランスフェリン受容体結合親和性の測定、エンドサイトーシスやエンドサイトーシスの再循環経路の研究が行われています(図41)。 インビトロジェンではこれらの研究用途にヒト血清から得られたトランスフェリンの広範なAlexa Fluor® コンジュゲートを提供しています(表25)。

図41
図41 Alexa Fluor® 594トランスフェリン(T-13343)で10分間、インキュベーションして初期エンドソームを標識したHeLaの生細胞。 ついで細胞をパラホルムアルデヒドで固定し、エンドソームタンパク質RhoDの抗体で標識した。その抗体をグリーン蛍光二次抗体で視覚化した。 黄色の蛍光は共存している領域を示す。 染色パターンを示すため、細胞を蛍光(左図)顕微鏡および微分干渉コントラスト(DIC)顕微鏡(右図)の両者で撮影した。 画像はHarry Mellor, University of Bristolからの提供。

表25 Alexa Fluor® ランスフェリンコンジュゲート
色素
カタログ番号
Alexa Fluor® 488
T-13342
Alexa Fluor® 546
T-23364
Alexa Fluor® 568
T-23365
Alexa Fluor® 594
T-13343
Alexa Fluor® 633
T-23362
Alexa Fluor® 647
T-23366


リポ多糖類のAlexa Fluor® コンジュゲート
リポ多糖類(LPS)や内毒素はグラム陰性菌の外側細胞壁に存在する複合巨大分子です。 CD14細胞表面受容体への食細胞の結合でおこるLPSの認識は、グラム陰性菌感染に対する哺乳動物の免疫反応における重要な開始因子です。 当社では現在、LPSの結合、輸送およびインターナリゼーションプロセスを追跡するために、Escherichia coliおよびSalmonella minnesotaから得られたLPSのAlexa Fluor® コンジュゲート(表26)を提供しています。

表26 Alexa Fluor® リポ多糖コンジュゲート
色素
Escherichia
coli

Salmonella
minnesota

Alexa Fluor® 488
L-23351
L-23356
Alexa Fluor® 568
L-23352
L-23357
Alexa Fluor® 594
L-23353
-


Alexa Fluor® 488アセチル化低密度リポタンパク質
低密度リポタンパク質(LDL)のアポタンパク質のリジン残基がアセチル化されるとLDL複合体はLDL受容体に結合しなくなりますが、修飾LDLに特異的な「スカベンジャー」受容体を有するマクロファージや内皮細胞によって取り込まれます。 当社の強い蛍光発光を示すAlexa Fluor® AcLDL(L-23380)を用いると、混合細胞集団中のマクロファージや内皮細胞を容易に同定できます。 Alexa Fluor® 488コンジュゲートはフルオレスセインとほぼ同一のスペクトル特性を有しており、顕微鏡造影とフローサイトメトリーの両者に適しています。


蛍光上皮増殖因子
蛍光標識された上皮増殖因子(EGF)を用いると、EGF受容体の側面の可動性(lateral mobility)やエンドサイトーシスを追跡できるようになりますが、フルオロフォアで直接標識したEGFではEGF当たりのフルオロフォアの数が足らずに容易に検出できなくなる可能性があります。インビトロジェンではAlexa Fluor® 488ストレプトアビジンと複合体を形成したビオチン化EGF(E-13345、図42)を提供しています。 EGFポリペプチド(6,045ダルトン)の代わりにストレプトアビジン(52,800ダルトン)にAlexa Fluor® 色素を結合することにより、EGF当たりのフルオロフォアの数を増加させることができ、従来のコンジュゲートと比較してEGF受容体当たり数倍明るいシグナルを生成するようになります。

図42
図42 グリーン蛍光Alexa Fluor® 488上皮増殖因子(E-13345)で10分間、インキュベーションして同定したHeLaの生細胞の初期エンドソーム。 ついで細胞をパラホルムアルデヒドで固定、後期エンドソームタンパク質RhoBの抗体で標識し、レッド-オレンジ蛍光二次抗体で視覚化した。 核はTO-PRO-3ヨウ化物(T-3605、疑似カラーブルー)で染色した。 画像はHarry Mellor, University of Bristolからの提供。


食作用をモニターするための蛍光細菌・蛍光酵母
蛍光細菌および蛍光酵母は食作用に影響を及ぼすさまざまなパラメータを研究するための確立されたツールです。 インビトロジェンでは蛍光標識した一連の加熱したかまたは化学処理した細菌および酵母といった、BioParticles® 製品のグリーンおよびレッドの蛍光のAlexa Fluor® コンジュゲート(表27)を提供しています。

表27 Alexa Fluor® BioParticles® 製品
BioParticles® 製品
Alexa Fluor® 488 Conjugate
Alexa Fluor® 594 Conjugate
Escherichia coli
(K-12 strain)

E-13231
E-23370
Staphylococcus aureus
(Wood strain without protein A)

S-23371
S-23372
zymosan A
(Saccharomyces cerevisiae)

Z-23373
Z-23374


カタログ番号
製品名
サイズ
A-12379
Alexa Fluor® 488 ファロイジンコンジュゲート
300 U
A-12380
Alexa Fluor® 568 ファロイジンコンジュゲート
300 U
A-12381
Alexa Fluor® 594 ファロイジンコンジュゲート
300 U
A-22281
Alexa Fluor® 350 ファロイジンコンジュゲート
300 U
A-22282
Alexa Fluor® 532 ファロイジンコンジュゲート
300 U
A-22283
Alexa Fluor® 546 ファロイジンコンジュゲート
300 U
A-22284
Alexa Fluor® 633 ファロイジンコンジュゲート
300 U
A-22285
Alexa Fluor® 660 ファロイジンコンジュゲート
300 U
A-22286
Alexa Fluor® 680 ファロイジンコンジュゲート
300 U
A-22287
Alexa Fluor® 647 ファロイジンコンジュゲート
300 U
E-13231
Escherichia coli BioParticles® , Alexa Fluor® 488 Conjugate
2 mg
E-23370
Escherichia coli BioParticles® , Alexa Fluor® 594 Conjugate
2 mg
L-23351
lypopoly saccharides from E.coli, Alexa Fluor® 488
100 μg
L-23352
lypopoly saccharides from E.coli, Alexa Fluor® 568
100 μg
L-23353
lypopoly saccharides from E.coli, Alexa Fluor® 594
100 μg
L-23356
lypopoly saccharides from S.minnesota, Alexa Fluor® 488
100 μg
L-23357
lypopoly saccharides from S.minnesota, Alexa Fluor® 568
100 μg
S-23371
Staphylococcus aureus BioParticles® , Alexa Fluor® 488 Conjugate
2 mg
S-23372
Staphylococcus aureus BioParticles® , Alexa Fluor® 594 Conjugate
2 mg
T-13342
トランスフェリンAlexa Fluor® 488 コンジュゲート
5 mg
T-13343
トランスフェリンAlexa Fluor® 594 コンジュゲート
5 mg
T-23362
トランスフェリンAlexa Fluor® 633 コンジュゲート
5 mg
T-23364
トランスフェリンAlexa Fluor® 546 コンジュゲート
5 mg
T-23365
トランスフェリンAlexa Fluor® 568 コンジュゲート
5 mg
T-23366
トランスフェリンAlexa Fluor® 647 コンジュゲート
5 mg
Z-23373
zymosan A BioParticles® , Alexa Fluor® 488 Conjugate
2 mg
Z-23374
zymosan A BioParticles® , Alexa Fluor® 594 Conjugate
2 mg

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