アポトーシス

原形質膜完全性

当社のカルボシアニン核酸染色剤である緑色蛍光YO-PRO-1染色剤(特許所有)は、アポトーシスを起こしている細胞を識別するのに有用です。アポトーシスを起こしている細胞はYO-PRO-1に透過性を示すようになりますが、プロピジウムアイオダイド(死細胞染色)には透過性を示しません。生細胞はYO-PRO-1では染色されないので、その後の実験にも使用することができます¹。YO-PRO-1は蛍光顕微鏡法にもフローサイトメトリーにも適応し、当社のVybrantアポトーシスアッセイキット#4と#7の重要な試薬です。YO-PRO-1とVybrantアポトーシスアッセイキットに含まれる他の色素(プロピジウムアイオダイドとHoechst 33342)は単品としてもご購入いただけます。

Vybrantアポトーシスアッセイキット#4、#5および#7の特徴

キット名	アポトーシス細胞染色剤	死細胞染色剤	検出マーカー	Cat.No.
Vybrantアポトーシスアッセイキット#4	YO-PRO-1	プロピジウムアイオダイド	原形質膜完全性の早期消失	V13243
Vybrantアポトーシスアッセイキット#5	Hoechst 33342	プロピジウムアイオダイド	クロマチン凝縮	V13244
Vybrantアポトーシスアッセイキット#7	Hoechst 33342および YO-PRO-1	プロピジウムアイオダイド	クロマチン凝縮と原形質膜完全性の早期消失	V23201

10 μMカンプトテシンで処理した(右図)、あるいは未処理(左図、対照)のJurkatヒトT細胞白血病細胞。次に細胞をVybrantアポトーシスアッセイキット#4で処理し、続いて、フローサイトメトリー分析を行った。A:アポトーシス細胞、V:生細胞、D:死細胞。

10 μMカンプトテシンによってJurkat細胞に誘発したアポトーシス。次に細胞をVybrantアポトーシスアッセイキット#4で処理し、アポトーシス細胞の核をYO-PRO-1色素(緑色)で標識し、プロピジウムアイオダイド(赤色)で後期アポトーシス細胞と死細胞を検出した。

Invitrogenでは、死細胞識別用に多数の膜非透過性核酸染色剤を取り扱っております。他の蛍光プローブと組み合わせると、これら色素は、蛍光顕微鏡法やフローサイトメトリーを使用して細胞中のアポトーシス細胞を識別するのに役立ちます。これら色素は、細胞透過性、核酸結合時の蛍光増感、励起および蛍光スペクトルなどの特長が異なっています。お客様の実験に最適な色素をお選びください。当社の核酸染色ダイマーサンプラーキットは、適切な色素をお選びいただけるように8種類の色素を提供しています。

死細胞識別用核酸染色のセレクションガイド

色素	Ex/Em *	Cat.No.
* ：DNA結合体色素の最大励起波長(Ex)および最大蛍光波長(Em)(nm) † ：POPO-1アイオダイド、POPO-3アイオダイド、BOBO-1アイオダイドおよびBOBO-3アイオダイドをプラスしたこれらの色素は核酸染色ダイマーサンプラーキットに含まれています。
SYTOX Blue nucleic acid stain	444/480	S11348
YOYO-1 iodide †	491/509	Y3601
SYTOX Green nucleic acid stain	504/523	S7020
TOTO-1 iodide†	514/533	T3600
Ethidium homodimer-1	528/617	E1169
SYTOX Orange nucleic acid stain	547/570	S11368
YOYO-3 iodide†	612/631	Y3606
TOTO-3 iodide†	642/660	T3604

参考文献:

1. J Immunol Methods 185, 249 (1995).

製品：

Cat.No.	製品名	サイズ
E1169	ethidium homodimer-1 (EthD-1)	1 mg
N7565	Nucleic Acid Stains Dimer Sampler Kit	1 kit
P1304MP	propidium iodide	100 mg
P21493	propidium iodide *FluoroPure grade*	100 mg
P3566	propidium iodide *1.0 mg/mL solution in water*	10 mL
S11348	SYTOX Blue nucleic acid stain *5 mM solution in DMSO*	250 μL
S11368	SYTOX Orange nucleic acid stain *5 mM solution in DMSO*	250 μL
S7020	SYTOX Green nucleic acid stain *5 mM solution in DMSO*	250 μL
T3600	TOTO-1 iodide (514/533) *1 mM solution in DMSO*	200 μL
T3604	TOTO-3 iodide (642/660) *1 mM solution in DMSO*	200 μL
V13243	Vybrant Apoptosis Assay Kit #4 *YO-PRO-1/propidium iodide* *200 assays*	1 kit
V13244	Vybrant Apoptosis Assay Kit #5 *Hoechst 33342/propidium iodide* *200 assays*	1 kit
V23201	Vybrant Apoptosis Assay Kit #7 *Hoechst 33342/YO-PRO-1/propidium iodide* *200 assays*	1 kit
Y3601	YOYO-1 iodide (491/509) *1 mM solution in DMSO*	200 μL
Y3603	YO-PRO-1 iodide (491/509) *1 mM solution in DMSO*	1 mL
Y3606	YOYO-3 iodide (612/631) *1 mM solution in DMSO*	200 μL