オルガネラと細胞骨格

固定細胞の核酸染色

細胞不透過性核酸色素は固定細胞の対比染色に有用です。核の染色には一般に浸透処理が必要とされ、細胞質RNAに結合した色素からのバックグラウンド蛍光を防ぐためRNase処理が功を奏することもあります。

固定細胞の核酸染色

製品	備考
SYTOXR核酸染色	水性溶液中では蛍光を放出せず、核酸との結合により?1000倍の蛍光増強を示す。 死細胞の染色に有用
シアニン系核酸染色	核酸に結合しない限りは蛍光を放出せず、DNAと結合するとプロピジウムアイオダイドの10-20倍の蛍光増強を示す。 可視スペクトルの全域から赤外線領域に及ぶ蛍光を放出
古典的核酸染色	DAPIー青色蛍光 エチジウムホモダイマー-1ー赤色蛍光 7-アミノアクチノマイシンDー赤色蛍光 プロピジウムアイオダイドー赤色蛍光
細胞核対比染色キット	DAPI、SYTOXR緑色色素およびプロピジウムアイオダイドの300倍溶液を含む。 これら3種類の色素が簡単にそろえることができる。

SYTOXR核酸染色

InvitrogenのSYTOXR核酸染色は青色蛍光(およその励起および蛍光波長はそれぞれ444 nm、480 nm)、緑色蛍光(504/523)および橙色蛍光(547/570)のものが利用でき、下記のような特長があります:

• 高い親和性で2本鎖DNAに結合
• 核の対比染色にRNase処理を必ずしも必要としない
• 2本鎖DNAと結合するとバックグラウンドを超える蛍光の増加を示す

シアニン系核酸染色(モノマーおよびダイマー)

　

特許取得済みのダイマーおよびモノマーシアニン色素は核酸に結合しない限りは蛍光を放出せず、DNAに結合したプロピジウムアイオダイドより10-20倍高い吸光係数を示します。核酸-結合色素の蛍光は可視スペクトルの全域から近赤外線領域までをカバーします。これらの色素は生細胞の膜は通常透過しませんが、死細胞では膜が損傷しているので明るく染色されます。これらの色素は単品試薬としてご購入いただけますが、当社の核酸染色ダイマーサンプラーキットもお試しください。このキットを用いると8種類の核酸染色を試験して実験に最適なダイマーシアニン色素を選ぶことができます。

当社のシアニン系核酸染色の数種類を下表に示しました。Invitrogenシアニン系核酸染色試薬に関しては当社Webサイト(www.probes.com)をご覧ください。

BODIPYR TR-Xファラシジン、ついでSYTOXR緑色核酸染色とともにインキュベートした成体のゼブラフィッシュ腸の凍結切片

固定細胞用シアニン系核酸染色

シアニン系染色	Ex/Em*	Cat.No.
* 色素-DNA複合体のおよその最大励起(Ex)蛍光(Em)(nm)† これらの色素とYOYOR-3アイオダイド, POPOTM-1アイオダイドおよびBOBOTM-1アイオダイドは核酸染色ダイマーサンプラーキットに含まれている。
モノマー色素
TO-PRO®-1 iodide	515/531	T3602
TO-PRO®-3 iodide	642/661	T3605
YO-PRO®-1 iodide	491/509	Y3603
ダイマー色素
TOTO®-1 iodide †	514/533	T3600
TOTO®-3 iodide †	642/660	T3604
YOYO®-1 iodide †	491/509	Y3601
POPO™-3 iodide †	534/570	P3584
BOBO™-3 iodide †	570/602	B3586

右側に記載のあるカラーキーで示したDNA結合シアニンダイマーの正規化蛍光スペクトル

古典的核酸染色

Invitrogenでは従来法を用いた固定細胞の核酸染色も豊富にそろえています。さまざまなプロトコールに適合するように、DAPIとプロピジウムアイオダイドは数種類のタイプで提供しています。これらの単品の試薬に加えて、細胞核対比染色キットも提供しており、希釈と染色に便利なDAPI、SYTOXR緑色色素およびプロピジウムアイオダイドの300倍溶液が含まれています。

固定細胞の古典的核酸染色

染色試薬	励起/蛍光*	Cat.No.	備考
* 色素-DNA複合体のおよその最大励起(Ex)および蛍光(Em)(nm)、†二塩酸塩、凍結乾燥品、‡二乳酸塩、凍結乾燥品、§FluoroPureR 級、凍結乾燥品、††凍結乾燥品、‡‡水溶性
DAPI	358/461	D1306 †, D3571 ‡, D21490 §	染色体と核の染色に有用 DNAのATリッチな領域に選択的 DNAと結合すると20倍の蛍光増強を示す。
エチジウムホモダイマー-1(EthD-1)	528/617	E1169	赤色蛍光死細胞インディケータとして有用 核酸に対してエチジウムブロマイドより1000倍高い親和性 DNAと結合すると40倍の蛍光増強を示す。
7-アミノアクチノマイシンD(7-AAD)	546/647	A1310	DNAと結合するとスペクトルシフトを起こす蛍光インターカレーター 7-AAD/DNA複合体はアルゴンイオンレーザーで励起し、610 nmを超える蛍光を放出するので、多色蛍光顕微鏡用の核酸染色として有用 DNAのGCリッチな領域に選択的
プロピジウムアイオダイド	535/617	P1304MP ††, P3566 ‡‡,P21493 §	近赤外の蛍光ピークに488 nmの励起光源が利用可能 DNAと結合すると20〜30倍の蛍光増強を示す。

製品：

Cat.No.	製品名	サイズ
A1310	7-aminoactinomycin D (7-AAD)	1 mg
B3586	BOBOTM-3 iodide (570/602) *1 mM solution in DMSO*	200 μL
C7590	Cytological Nuclear Counterstain Kit *DAPI/SYTOXR Green/PI* *300 slides*	1 kit
D1306	4',6-diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride (DAPI)	10 mg
D21490	4',6-diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride (DAPI) *FluoroPureTM grade*	10 mg
D3571	4',6-diamidino-2-phenylindole, dilactate (DAPI, dilactate)	10 mg
E1169	ethidium homodimer-1 (EthD-1)	1 mg
E1374	ethidium monoazide bromide (EMA)	5 mg
N7565	Nucleic Acid Stains Dimer Sampler Kit	1 kit
P1304MP	propidium iodide	100 mg
P21493	propidium iodide *FluoroPureTM grade*	100 mg
P3566	propidium iodide *1.0 mg/mL solution in water*	10 mL
P3584	POPOTM-3 iodide (534/570) *1 mM solution in DMF*	200 μL
S11348	SYTOXR Blue nucleic acid stain *5 mM solution in DMSO*	250 μL
S11368	SYTOXR Orange nucleic acid stain *5 mM solution in DMSO*	250 μL
S7020	SYTOXR Green nucleic acid stain *5 mM solution in DMSO*	250 μL
T3600	TOTOR-1 iodide (514/533) *1 mM solution in DMSO*	200 μL
T3602	TO-PROR-1 iodide (515/531) *1 mM solution in DMSO*	1 mL
T3604	TOTOR-3 iodide (642/660) *1 mM solution in DMSO*	200 μL
T3605	TO-PROR-3 iodide (642/661) *1 mM solution in DMSO*	1 mL
Y3601	YOYOR-1 iodide (491/509) *1 mM solution in DMSO*	200 μL
Y3603	YO-PROR-1 iodide (491/509) *1 mM solution in DMSO*	1 mL