細胞トレーシングツール

長期細胞トレーシング試薬

チオール反応性トレーサー

Invitrogenは、数世代にわたって多くの生細胞に保持され、細胞群中で隣接する細胞にほとんど移動しない蛍光産物を生成する幾つかのチオール反応性CellTracker™プローブを開発しました。一度細胞内に入り込むと、この色素は、GSTを介した反応と考えられている反応で、膜非透過性グルタチオン蛍光色素付加体を生成します。このようなプローブは、蛍光色素の細胞保持を著しく向上させます。これらは、移植した細胞や組織に対する理想的な長期トレーサーです。CellTracker™プローブには下記のような特長があります。

• 生細胞の膜を通って自由に拡散します。
• 標識した細胞は、ローディング後少なくとも24時間、しばしば数回の細胞分裂を経ても、蛍光を発し、生存しています。
• ペプチド蛍光色素付加体は、ホルムアルデヒドもしくはグルタルアルデヒド固定後でも保持されます。

長期細胞トレーシング用チオール反応性CellTrackerプローブ

CellTracker™ 色素	Ex/Em	蛍光	Cat.No.
* CellTracker色素のおよその最大励起(Ex)と蛍光波長(Em)(nm)。CellTracker™グリーンCMFDAは酢酸エステルを加水分解した後の値。 † pH依存性スペクトル。pH9以上で調べた。‡ 20x50 μgの包装。
CellTracker™ Violet BMQC	415/516	蛍光	C10094
CellTracker™ Blue CMAC	353/466	蛍光	C2110
CellTracker™ Blue CMF2HC	371/464	蛍光	C12881
CellTracker™ Green CMFDA	492/517†	エステラーゼ分解後のみ蛍光	C2925, C7025‡
CellTracker™ Orange CMTMR	541/565	蛍光	C2927
CellTracker™ Orange CMRA	548/576	エステラーゼ分解後のみ蛍光	C34551‡
CellTracker™ Red CMTPX	586/613	蛍光	C34552

新発売　 CellTracker™ Violet BMQC！ Blue CMACより4倍明るい蛍光色素です。バイオレットレーザー(405nm）で励起できます。 *24時間以上トラッキングしたい方はViolet BMQC以外の蛍光をご使用ください。

 

CellTracker™グリーンCMFDAで標識した無傷の海底堆積物コア試料中の生物。顕微鏡写真より、深海底生有孔虫である微生物Leptohalysis scottiが認められる。画像は、Joan M. Bernhard氏(Wadsworth Center, New York State Department of Health)からの提供。

CellTracker™オレンジCMTMRで染色したHL60細胞と、CellTracker™グリーンCMFDAで染色したWEHI 7.1 細胞とを混合したもの(左図)。細胞混合物を電気融合すると、そのハイブリッドは黄色蛍光によって容易に区別することができる(右図)。画像は、Mark J. Jaroszeski氏(University of South Florida)からの提供。

ラット好塩基性白血病(RBL)細胞を、懸濁液中でCellTracker™ブルーCMAC、CellTracker™グリーンCMFDAあるいはCellTracker™オレンジCMTMRで標識後、プレーティングして培養したもの。

アミン反応性トレーサー

デザインと用途においてチオール反応性CellTracker™プローブと同じようにCellTraceアミン反応性トレーサーは、細胞に良好に保持され、タンパク質または他のアミン含有生体分子と反応すると、アルデヒドベースの固定液で間接的に固定することができます。このようなアミン反応性トレーサーには下記のような特長があります。

• 生細胞膜を通って自由に拡散します。
• 細胞内エステラーゼがCellTracker™プローブの酢酸エステル基を切断し、非常に蛍光の強いアミン反応性フルオロフォアが生成します。
• 胚発生時の細胞が移動し分裂する間でも、細胞内に良好に保持される色素・タンパク質付加体が生成します1、2。

長期細胞トレーシング用アミン反応性CellTraceプローブ

CellTrace™アミン反応性トレーサー	励起/蛍光*	備考	Cat.No.
* 脱エステル化した細胞トレーサーのおよその最大励起(Ex)と最大蛍光(Em)(nm)。値は細胞環境によってやや変動すると思われる。†pH依存性スペクトル。スペクトルはpH>9で測定。 ‡ この製品は細胞内エステラーゼによる分解前に蛍光を発する。
カルボキシフルオレセインジアセテート、サクシニミジルエステル(CFSE)	492/517†	25 mgサイズ	C1157
VybrantR CFDA SE細胞トレーサーキット	492/517†	10本の500 μgのCFSE色素と色素調製用DMSO、細胞標識プロトコールを含む	V12883
CellTrace™ CFSE細胞増殖キット	492/517†	10本の50 μgのCFSE色素と色素調製用DMSO、フローサイトメトリーを用いた細胞トレーシング用プロトコールを含む	C34554
CellTrace™オレゴングリーン488(カルボキシ-DFFDA, SE)	492/518	20本のDFFDA SE色素50 μgを含む	C34555
SNARFR-1カルボン酸、酢酸、サクシニミジルエステル	576/635†	赤系。10本のSNARFR-1カルボン酸、酢酸SE色素50 μgを含む	S22801
CellTrace™ファーレッドDDAO-SE‡	646/659†	近赤外。10本のDDAO-SE色素50 μgを含む	C34553

参考文献：

1. J Cell Biol 101, 610 (1985); 2. J Cell Biol 103, 2649 (1986).

製品：

Cat.No.	製品名	サイズ
C10094	CellTracker™ Violet BMQC	5 X 0.1mg
B2103	8-bromomethyl-4,4-difluoro-1,3,5,7-tetramethyl-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene (BODIPY 493/503 methyl bromide)	5 mg
C1157	5-(and-6)-carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester (5(6)-CFDA, SE; CFSE) *mixed isomers*	25 mg
C12881	CellTracker™ Blue CMF2HC (4-chloromethyl-6,8-difluoro-7-hydroxycoumarin)	5 mg
C2102	CellTracker™ Green BODIPYR (8-chloromethyl-4,4-difluoro-1,3,5,7-tetramethyl-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene)	5 mg
C2110	CellTracker™ Blue CMAC (7-amino-4-chloromethylcoumarin)	5 mg
C2925	CellTracker™ Green CMFDA (5-chloromethylfluorescein diacetate)	1 mg
C2927	CellTracker™ Orange CMTMR (5-(and-6)-(((4-chloromethyl)benzoyl)amino)tetramethylrhodamine) *mixed isomers*	1 mg
C34551	CellTracker™ Orange CMRA *special packaging*	20 x 50 μg
C34552	CellTracker™ Red CMTPX *special packaging*	20 x 50 μg
C34553	CellTrace™ Far Red DDAO-SE *special packaging*	20 x 50 μg
C34554	CellTrace™ CFSE Cell Proliferation Kit *for flow cytometry*	1 kit
C34555	CellTrace™ Oregon Green 488 carboxylic acid diacetate, succinimidyl ester (carboxy-DFFDA, SE) *cell permeant* *mixed isomers*	20 x 50 μg
C7025	CellTracker™ Green CMFDA (5-chloromethylfluorescein diacetate) *special packaging*	20 x 50 μg
S22801	SNARFR-1 carboxylic acid, acetate, succinimidyl ester *special packaging*	10 x 50 μg
V12883	Vybrant CFDA SE Cell Tracer Kit	1 kit