FluxOR Thallium Detection Kit/hERG導入用BacMam-hERG FluxOR Thallium Detection Kit

特徴

1. K+チャネルに特異的−電圧開口型、リガインド開口型のカリウムチャネルに適合します。
2. 迅速―ハイスループットモードで高い再現性が得られます。
3. 薬理学的に関連―既知のブロッカーは大きなシグナルウインドウで用量依存的抑制を示しました。
4. 優れたシグナルノイズの抑制―蛍光指示薬は細胞外では弱い蛍光を示します。
5. 励起/蛍光の最大波長は490/525 nm
   
   

   FluxORタリウム感受性色素エステルを細胞にロードします。　細胞内に取り込まれ、内在性エステラーゼによりAMエステルが切断され、細胞外にトラップされます。細胞外への放出はキット中のプロベネシドにより妨げられます。　色素をロード後、アッセイバッファーで色素を置換します。アゴニストやマイルドな脱分極で、カリウムチャネルを開く刺激溶液と共に少量のタリウムを細胞に加えます。　開いたチャネルを通りタリウムは細胞内に入り、タリウム色素と結合して蛍光が発色します。

FluxOR Thallium Detection KitはロースループットメソッドによるIC50値に相当するデータの再現性が得られます。この均一なアッセイは、タリウムイオンのトランスポーターとカリウムチャネルの透過性を利用しています。 外部媒体からのタリウム流入刺激によりチャンネルが開けられるとき、非常に高感度のインジケーターとなります。 結果として生じる蛍光量は、イオンチャンネルの活性とタリウムに透過するトランスポーターを反映しています。

FluxORタリウム検出とBacMam-hERGによる　hERGのアゴニストのスクリーニング

BacMam-hERGでhERGを細胞に導入し、蛍光検出でタリウムの変動を測定します。

特徴

1. 便利―多くの細胞タイプへのBacMam技術によるhＥＲＧの非細胞変性的で効果的な導入が可能。
2. 効率的―形質導入した細胞を凍結し、最適なアッセイをいつでも再現性よくスピーディに行えます。
   
   
   

   A　B：U-2OS細胞でのFluxORタリウム流入アッセイ細胞はBacMam-hERGでhERGで形質導入され、冷凍されスクリーニングの4時間前に解凍しプレート化した。矢印はカリウム/タリウム刺激を示す。その後、薬剤シサプリドによりカリウムチャネルの影響を蛍光検出にて測定する。 C:　形質導入後1晩インキュベートした新鮮な細胞。 D:　BacMamにて形質導入後された細胞　液体窒素にて保存され、スクリーニング4時間前までに解凍プレート化された細胞。FlexStation II 384 (MolecularDevices, Sunnyvale CA).で測定。

   
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